各种真空采血管头盖的颜色均为国际通用标准，试管上的标签有刻度线、取血量、有效期、内含添加剂物等。报告周期中未注明上、下午时，时间从收取标本当日17:00开始计算

第一章  标本正确采集的临床意义

  临床各种标本的采集与管理是临床检验的基础，是分析前质量保证的重要环节，涉及患者的准备、存放标本容器的准备、以及标本的采集、处理、储存和运送等。了解影响检验结果的生物学因素、患者的准备、取样技术引起的检验分析前变异、标本的签收、标本储存和运转以及废弃标本的处理等，对正确采集各种临床标本非常必要，是保证获得准确可靠的检验结果的基础与前提，对防治污染物和传染病的扩散也有重要意义。

第一节  影响检验结果的生物学因素

  1、年龄：从胎儿出生到儿童、成年和老年各时期检验项目的参考范围有所不同。新生儿出生几天内红细胞（RBC）计数和血红蛋白（Hb）含量比成人高，儿童尤其是青春期青少年血液碱性磷酸酶（ALP）活性比成人高，总胆固醇（TC）随年龄的增长而上升，70岁以后有下降趋势。

  2、性别：有些检验结果男女差别较大，男性血液肌酐（Cr）、肌酸激酶（CK）、甘油三酯（TG）、γ-谷氨酰转移酶（GGT）、胆红素、转氨酶、尿素、RBC及Hb等含量高于女性，而高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、载脂蛋白（Apo）AI、女性激素和网织红细胞等指标女性高于男性。

  3、妊娠：随着孕周的增长，孕妇甲状腺素分泌增加，总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量减少，肾小球滤过率增加，尿量增多，血沉加快，凝血因子活性增强，纤维蛋白原增多，甲胎蛋白升高。

  4、饮食：

  （1）餐后采血对血脂、血糖（GLU）、转氨酶、胆红素、无机磷、尿酸、尿素、总蛋白、钾、钠、钙等有较大的影响，可使血液丙氨酸氨基转移酶（ALT）、GLU、尿素、钠等升高。但空腹若达24小时以上，可出现低血糖，血中TG、游离甘油及脂肪酸可增高。

  （2）高脂餐后2～4小时采血，多数人ALP含量增高，0型或B型血兼为Le⁺分泌型者增高更为明显。

  （3）高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加，但不影响肌酐含量。

  （4）高比例不饱和脂肪酸食物，可减低胆固醇含量；香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。

  （5）含咖啡因饮料，可使雪娇有力脂肪酸增加，并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。

  （6）食物如含有动物血液，可引起便潜血试验假阳性。

  （7）饮酒可导致血糖降低以及血浆乳酸、尿盐酸、乙醇、乙酸盐增高；长期饮酒者HDL-C、TC及GGT偏高，平均红细胞体积值增高。

  5、吸烟：嗜烟者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%（不吸烟者在1%以下）儿茶酚胺、血清可的松比不吸烟者含量高；嗜烟者血液白细胞（WBC）增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、Hb偏高、平均红细胞体积偏高。

  6、运动：运动能影响许多检验结果。与安静状态相比，剧烈运动可使血浆脂肪酸含量减少以及乳酸、CK、乳酸脱氢酶（LDH）、ALT、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、GLU、钾、钠、钙、ALP、ALB、无机磷、尿素、尿酸及胆红素等含量升高。长期体育锻炼能提高性激素水平，有些指标在运动后恢复较慢，如ALT在停止运动1小时后测定，其值仍可偏高30～50.

  7、生物节律：血液有些成分一天内会出现周期性变化，如WBC上午低于下午，皮质醇早上高于晚上，生长激素在入睡后增高，血钙中午最低，血浆蛋白夜间降低；女性激素与月经周期有密切关系，TC则在经前期最高，排卵时减少。生长激素在入睡后出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高；血浆蛋白在夜间降低；血钙往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。

  8、药物和毒品：维生素C可干扰葡萄糖氧化酶法测定血糖，使之降低而被误认为低血糖；长期口服避孕药和雌激素类药物可使转铁蛋白、TG升高：吗啡可使血淀粉酶、脂肪酶、转氨酶、ALP、胆红素等升高以及胰岛素、去甲肾上腺素等降低；大麻可使血钾、钠、氯、尿素和胰岛素等升高以及肌酐、尿酸、血糖降低。

第二节  患者的准备

为了获得准备的检验结果，检验标本采集前患者的准备非常重要。在了解上述生物学因素对检验结果影响的基础上，还要注意标本采集前患者的状态对检测结果的影响，不同检测项目对标本采集前患者的状态有不同的要求。许多非疾病因素，如是否空腹、精神状态、体力活动、使用药物等都可能影响检验结果。因此，在标本采集前，要根据需要嘱患者做好相应的准备。

  1、除特殊项目有专门要求外，一般要求患者采血前禁食12-14小时，以避免进食后消化吸收的营养物质影响检验结果。如晚8时至次日早8时禁食后抽血（10时前完成，其间可适当饮水，不可食零食或任何食物）。如禁食时间太长（饥饿）部分测定值会降低。血肌酐特别是内生肌酐清除率检测前须禁肉3天，且不能饮咖啡和茶等。采血样前按摩前列腺可引起酸性磷酸酶（ACP）的升高。

  2、尿液检查按不同项目分别留取晨尿、随机尿、计时尿等；测定尿儿茶酚胺除停服有色药物及激素类药物外，还需停食香蕉、咖啡、巧克力等3天。

  3、便潜血（隐血）试验前要素食，禁食含动物血的食物等；微生物培养检查最好在使用抗生素之前。

  4、许多诊疗手段如全身体格检查、外科手术、透析、输血、穿刺、X线检查、内窥镜检查等也会对检验结果有影响。如外科手术可引起急性时相蛋白（如CRP）的升高，从而导致血沉加快。因此，应在进行相关检查或诊疗手段前采血。

  5、注意一些药物对检验结果的影响，如异菸肼、庆大霉素、氨苄青毒素等药物可使ALT活性增高，咖啡因可使胆红素增加。

  目前公认运动、过度空腹、饮食、饮酒、吸烟及体位等因素影响某些检查结果，应尽量避免。

第三节  取样技术引起的检验分析前变异

  与取样有关的因素如姿势、止血带的使用、标本采集时间、溶血、输液、外源性污染等都会影响检验分析结果。

  1、姿势：

  从仰卧位到直立位的过程中，大约有8%的体内水由血管中进入间质组织中。患者由直立位转为坐位或仰卧位后，抽血测得的蛋白质、蛋白质结合物、细胞比至少让患者仰卧10min后抽血所测定的结果要高3-8%。对于一些参数，由上述原因所导致的影响要比分析不精确的影响还要大，例如RBC、WBC、Hb、PLT、红细胞比容（HCT）、TP、TC、免疫球蛋白、钙离子、载脂蛋白、甲状腺素、醛固醇、肾上腺素、肾素、ALP、AST等。这种改变在水肿的患者比健康人更明显。如由卧位改为站位，血浆ALB可增高，TP、酶、钙、胆红素、TC、TG、Hb、HCT、RBC，因站位而增高。采集标本时要注意保持正确的体位及体位的一致性。因此，除特殊要求外，一般尽量统一坐位采血，以减少生理现象带来的误差。

  2、止血带的使用

  静脉加压和体位从水平位变为垂直位由相同的效应，所有的高分子物质也增加，如10min的加压时间可使TP升高20%。据文献报道，使用止血带1min，血样中的各检测指标（包括凝血因子V）都没有明显改变。系止血带3min后，ALB、钙、ALP、AST、TC、血钾、铁及乳酸等浓度可升高5-10%。当患者浅表静脉不明显时，医护人员往往鼓励患者反复握拳，以使静脉暴露更明显，比起静态采血，这种运动会使某些物质的阈值上升。止血带压力过大或加压时间过长，可使血管内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）从而溶纤性增加或加速血小板激活而使血小板因子4（PF4）分米增加。因此，应尽量在使用止血带1min内采血，看到回血后，马上松开止血带，当需要重复使用止血带时，应改用对侧手臂。

  3、采血时间

  主要有下述4种时间：（1）早晨空腹采血；一般指患者空腹12小时在上午采血，常用于临床生化和免疫检查。为避免采血时间不同而造成的检验结果波动，每次采血最好在同一时间进行。（2）急诊采血：是指急诊或抢救患者时根据需要立即采血。（3）随机采血：指无时间限制随时进行采血，被检者一般无需准备。主要用于体内代谢稳定或受体内干扰较小的物质的检测，如红细胞计数、血清蛋白质测定、肝炎标志物测定等。（4）指定时间采血：根据试验要求，在指定时间采血，如葡萄糖耐量试验、内分泌腺的兴奋或抑制试验、肝脏摄取和排泄功能试验、治疗药物浓度监测等。

  4、采血部位与采血量0.

为避免监测结果受输液成分的影响，一般避免输液时采血，如必须采血，则应在输液患者另一侧手臂采血在，若双臂都在输液，则不能再静脉输液装置洗的近端进行采血。有些实验对采血量要求很严，特别是进行凝血因子检查时，如果血液比例过高，由于抗凝剂的相对不足，血浆中出现微血凝块的可能性增加，微血凝块可能阻塞检测仪器而影响检测结果；如果血液比例过低，则由于抗凝剂的相对增加，而引起PT、APTT的演唱或显著延长。

  5、溶血

  避免标本溶血时保证标本质量的重要环节，采血时的一些不良习惯和劣质采血器均易造成溶血。如：采血不顺利、抽血速度太快、血液注入容器时未取下针头或用力过猛、注射器和针头连接不紧，采血时有空气进入或产生泡沫等均可造成溶血。另外，由于玻璃管壁带有负电荷，其表面的细小不整处，可吸附血细胞并可造成细胞溶解或由于细胞布朗运动的撞击而造成溶血。因此，注射器和容器内壁一定要光滑或使用塑料制品，以避免溶血。

  溶血的标本对检验结果影响很大，可使测定结果假性升高，如血钾、胆红素、LDH、转氨酶等；另外，溶血标本中的红细胞成分可干扰生化反应过程和比色结果。实验室发现溶血后，应区分是病理性溶血（血管内溶血）还是技术性溶血，如果排除血管内溶血，应及时与客户联系，并建议重采标本，如果不能重采，应在报告单上注明“溶血标本”，并告知客户由于溶血可能对检验结果造成的影响。当肉眼未见溶血，但LDH、Hb、ALT或血钾等值异常升高时，应警惕是否有非显性溶血存在。

第四节  标本的签收

  1、检验申请单填写要求字迹清楚，内容完整应包括送检客户、患者姓名、条码号、性别、年龄、床号、病例号、标本类型、开单时间、采样时间、送检时间、有关的临床资料（如临床诊断、特殊病理变化或用药史等）、送检项目等。对于一些特殊检验申请，还需要提供患者知情同意书，特殊情况如口头申请按检验所有关要求进行。

  2、采集标本应按医嘱执行，必要时嘱患者做相应准备。采集时根据目的选择适当容器，容器外须注明患者相关信息如姓名、条码号等。采集前后需认真核对申请项目及患者信息。标本采集后应及时送检。对非操作因素引起的溶血、脂血或胆红素血，应在检验报告上注明。

  3、标本采集后应按要求尽快送检。特别需要注意的是，一定要按生物安全防护的要求，使用专门的容器进行标本送检。

  4、标本交接时，交接人员相互之间要做好标本交接填写内容，并在交接凭证上双方签字。

  5、标本的拒收标本。

 （1）检验申请单与容器标识不对应；标本标记不清、标记错误或无标记、标记与申请单不符等。

 （2）标本采集管使用错误，如PT、APTT、FBG、TT、DD应使用枸橼酸钠抗凝管等。正确使用抗凝剂比例；不同标准真空采血管的正确使用等。

 （3）标本采集的量不符合检验要求。实验室通过定期评审标本采集量以保证采样量不会不足也不会过多。

 （4）人为因素所致的标本溶血。

 （5）标本运输不当，如应该冷藏而未冷藏的标本，应该用盖密封的标本。

 （6）标本未按时送检。

 （7）检验申请单和或容器被标本污染。

 （8）标本储存或运送不当、标本已干、厌氧细菌培养标本未按要求取材送检，细菌培养无菌部位标本被污染。

 （9）其它未按要求留取标本等情况。

  6、标本拒收、标本需复检或进一步检验时，检验所应注意与客户沟通。

  7、检验人员收到检验申请单后方可处理标本。

  8、检验申请单应保存至少二年（特殊要求除外）。

第五节 、标本储存和转运

标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本因为各种因素使检验结果受到影响，因此必须正确掌握标本保存和运送方法。标本采集后应按要求尽快处理或储存（转运），如在室温放置时间过久会造成血液成分的变化（如血糖及酶活性降低），也可造成溶血现象。血清钾、氯含量会随放置时间延长而增高，葡萄糖可因红细胞利用而降低。若标本不能及时测定，则要保证标本的保存和运输尽量减少对检验结果的影响。尿液、脑脊液和胸腹水等标本应按要求进行离心（或处理），然后进行检测。

  一些需要注意的问题有：

1、标本一般应密闭贮存在试管或其他容器中，防止外溅而且避免因水分挥发导致标本浓缩。

2、有些成分如胆红素在光照下分解，需要避免光线照射。

3、分离后的血清或血浆若不能及时检测或需保留以备复查时，应4℃保存；淀粉酶、LDH应室温保存；某些检测项目要求-20℃保存。一般不能将未经分离的血液标本直接放入4℃冰箱，更不能冰冻，以免红细胞破坏发生溶血。

4、某些特殊项目如促肾上腺皮质激素（ACTH），血浆胰高血糖素等在室温下保存不稳定，应置冰浴中送检，然后低温离心，分离出血浆-20℃保存。

5、若标本不能及时运转到实验室进行检测，应按要求进行处理，如将标本装入试管密封放入冰壶或冷藏箱内进行送检。

6、标本运送由检验所客服部专员负责转运，途中不可无故延误并保证标本安全送达检验所。

第六节、废弃标本的处理

  应视所有标本为具有传染性的污染物，在完成临床检测工作的前提下，应按要求对这些标本进行保存（以备复检）或按特殊医疗废弃物进行专门处理。

  严禁标本直接用口吸取、接触皮肤或污染器皿外部和试验台。

  废弃的血液标本、容器及污染物由检验所实验室内卫生员统一收集后进行高压消毒，然后再进行处理。

  其他内容与要求参见检验所编写的《生物安全管理程序》。

第二章、临床检验原始样本的采集方法与要求

第一节  血液标本采集

一、血液标本的采集方法

血液标本可来自于静脉、动脉、或毛细血管。采血一般在上午进行。采血前须核对患者姓名、性别、年龄及检验项目等，按检验项目要求，准备好相应的采血管。患者应取坐位或卧位。采血前应向患者作适当解释，以消除不必要的疑虑和恐惧。

1、静脉采血法：采血部位通常是前臂肘窝的正中静脉。肘部静脉不明显时，可用手背静脉或内踝静脉。幼儿可于颈外静脉采血。采血时间根据所测项目而异。抽血后用棉签押金穿刺部位约10min。

2、毛细血管采血法：毛细血管采血主要用于儿童。成人毛细血管血常采自手指或耳垂。但耳垂外周血循环较差，血细胞容易停滞， 且受气温特别是冬季影响较大。毛细血管红细胞、白细胞、血红蛋白和血细胞比容结果均比静脉血高。手指采血操作方便，一般选取左手无名指内侧采血，该部位应无冻疮、炎症、水肿或破损。婴幼儿手指太小可采拇指或足跟血。严重烧伤患者可选择皮肤完整处采血。

3、动脉采血法：动脉血标本多用于血气分析及PH测定。

二、采血要求

1、防止溶血。造成溶血的因素有：注射器和容器不干燥、不清洁；淤血时间过长；穿刺不顺利，组织损伤过多；抽血速度太快；血液注入容器时未取下针头或注入速度过快产生大量泡沫；震荡国语剧烈等。体内溶血属合格标本，但应在申请单上注明。

2、避免充血和血液浓缩。采血时应动作迅速，尽可能缩短止血带使用时间。用止血带压迫时间最好不超过1min，以避免淤血或血液浓缩而导致检验结果升高或下降。

3、若患者正在进行静脉输液，不宜在输液同侧手臂采血；若女性患者作了乳腺切除术，应在手术对侧手臂采血。

4、保持正确的采血体位。体位改变可引起血液中的许多指标发生改变。一般采取坐位采血，其测定值比卧位高5-15%。采血时要保持坐位或卧位的一致性。

5、采血时只能向外抽，不能向静脉内推，以免注入空气，形成气栓而造成严重后果。

6、采血顺序：如果一次采血要采取几个标本时，应推荐一下顺序采血：a）血培养管；b）无添加剂管；c）凝血试验管；d）有添加剂的管（不同添加剂管按一下顺序采血；1）枸橼酸盐管；2）肝素管；3）EDTA管；4）草酸盐/氟化物管）。

三、不同检测项目的采血要求

1、必须空腹（通常指禁食8-12h，其间只允许适当饮水）的检测项目。主要有血糖、脂类、铁、总铁结合力、GGT、胰岛素等。总胆汁酸（TBA）要求12h以上。

2、血糖

采血后立即送检。血糖含量随时间延长而下降，婴幼儿血糖下降程度更明显。尿或脑脊液葡萄糖测定要求尿液或脑脊液标本新鲜。

3、糖耐量试验

受检者处于正常生活饮食状态，实验前3天有足够碳水化合物饮食（每天不低于150g），同时停用可能影响该结果的药物，避免剧烈运动及精神紧张，空腹8-12h，其间可饮水，但不能吸烟。取坐位采血，实验过程中须禁食、不饮茶和咖啡、不吸烟。空腹取血一次，然后5min内饮入250-300ml含75g无水葡萄糖（儿童1.75g葡萄糖/kg，最多不超过75g，或吃2两馒头）。口服葡萄糖0.5h或1h、2h、3h后各取血2ml，或遵医嘱。

4、凝血功能检查

使用对凝血因子无激活作用的采血管采血，采血应顺利，采血量必须符合要求。采血后标本如有溶血、黄疸、脂血、凝块、乳糜血需重取血。采血后立即送检。

5、血液流变学

温度、标本存放时间等因素可引起红细胞聚集、变形及血浆粘度发生改变，标本应于室温尽快送检。

6、细胞免疫功能及补体测定

细胞免疫功能检测要求淋巴细胞和白细胞新鲜，补体随保存时间延长而失活，标本及时送检。

7、唐氏筛查

唐氏筛查与月经周期、体重、身高、准确孕周、胎龄大小有关。孕15-20周为唐氏筛查最佳时间。一般要求高领孕妇（35岁以上者）做唐氏筛查。

8、血培养

（1）血培养的采血指征：提问≥38℃或≤36℃；寒战；白细胞增多（＞10*10^9/L，特别有“核左移”未成熟或杆状白细胞）；血小板减少；皮肤黏膜出血；昏迷，多器官衰竭；或同时具备以上几种体征时应采血培养；老年人或免疫力低下者，提问正常或白细胞计数小于10.0*10⁹L，白细胞分类中中性粒细胞大于70%；最佳采血时机；抗菌药物使用前，寒战和发热初期时。

（2）一般血培养的采血方法与要求：为防止皮肤寄生菌污染，须严格皮肤消毒处理，采血过程应严格无菌操作。血培养污染一定要减少至最低程度。美国CLSI推荐的皮肤消毒方法为：确定静脉穿刺点，用70%异丙醇消毒待干，安而碘（碘0.23%、醋酸氯已啶0.5%、乙醇65%均匀涂擦两遍，消毒直径5cm，每变作用30s，即可穿刺。标本接种后需立即送检，如不能立即送检，应室温保存，不能冷藏。）

第二节  尿液标本采集

一、患者准备

尿液标本一般由患者或护理人员按照医嘱留取，为了正确手机尿液标本，医护人员应该根据尿液检验项目的目的、标本种类等，口头和书面指导患者如何正确手机尿液标本告知注意事项。

主要包括：①清洁标本采集部位：应用肥皂洗手、清洁尿道口及其周围皮肤；②避免标本污染：应避免月经、阴道分泌物、包皮垢、分辨、清洁剂等各种物质污染尿液标本。不能从尿布或便池内采集尿液标本。此外还要注意一些事物或药物对检验结果的影响。

二、尿液标本手机的容器

手机尿液标本的容器多种多样，留取标本最基本的要求是使用清洁、干燥、方便的容器（最好有盖）。最好使用医院提供的一次性尿杯或尿管。

三、手机尿液的方法

1、自然排尿法：适用于尿常规检查、细菌图片检查和细胞学检查。留尿时，注意防止尿道口分泌物的污染，特别是女性患者易受阴道分泌物污染。临床最常规的方法是采用中段尿法。

2、导尿或穿刺法：对于自然排尿困难的患者或为了避免女性患者阴道分泌物的污染，可采用导尿管导尿或在耻骨上穿刺膀胱取尿。此法也可用于婴幼儿的尿标本采集。

四、尿液标本的种类

1、首次晨尿标本：手机清晨起床后的第一次尿液标本，此尿液为浓缩尿、最适合于尿常规检查，如果糖、尿蛋白、亚硝酸盐检查，因其细胞和管型等形态完整，故特别适合细胞、管型等尿液有形成分的显微镜检查。

2、随机尿标本：随机留取任何一个时间的尿液标本，不受条件的限制，此类标本容易获得，是尿常规检查最常用的方法，但受饮水、饮食和手机时间等多种因素影响，病理成分容易漏珍。仅适用于门诊、急诊患者的常规过筛检验。

3、空腹尿标本：即进餐前的尿液标本。此标本适用于糖尿病患者餐前尿糖测定。

4、餐后尿标本：通常是在餐后两小时手机的尿液。其对于病理性蛋白尿、糖尿检查更为敏感。午餐后对尿胆原检查阳性率高。

5、12h尿标本：即患者正常进食、晚上8点排空膀胱内的尿液，再收集以后12h内所有尿液标本（包括次日8时尿液）。将全部尿液充分混匀，用1000ml量桶量取并记录总量，最后用尿管取5-10ml送检。可用于尿沉渣计数等，也可用于尿液微量蛋白排泄率测定。

6、24h尿标本：患者上午8时排尿一次，将膀胱排空，弃去尿液，伺候手机各次排除的尿液，直至次日上午8时最后一次排尿亦收集于容器内。应准确测量并记录总尿量，混匀后取适量标本（5-10ml）送检。此标本用于体内某些代谢产物的定量检测，如尿蛋白、尿糖、尿肌酐、尿钙、尿儿茶酚胺检查等。

7、尿培养标本：留尿前先清洗外阴，再用0.1%新洁尔灭火0.5%络合碘等消毒尿道口后，在不断排尿过程中，弃去前、后时段的尿液，以无菌容器只接留中间时段的尿液10ml；必要时可通过导尿或膀胱穿刺取样。

对无自控能力的小儿科用收集尿包收集尿液，由于会阴部菌群污染产生假阳性应结合临床进行分析。

利用留置导尿管采集尿液：不能收集袋中尿液，应先消毒导尿管外部，按无菌作用注射器通过导尿管吸取尿液10-15ml于灭菌容器内送检。

标本手机后应及时送检，否则应置于4-8℃保存。

五、尿液标本的保存

尿液化学物质和有形成分不稳定，排出后即开始发生物理和化学变化，如胆红素、尿胆原被氧化，抗坏血酸消失，细菌生长，尿素酵解生成氨使尿PH升高，尿液有形成分破坏，葡萄糖被细菌利用而降低。因此尿标本要尽快送检，如不能及时送检或分析，必须采取保存措施，常用方法有两种：

1、冷藏法：冷藏可抑制微生物生长，维持尿液PH恒定，使尿中有形成分的形态基本不变，但4℃条件下冷藏不得超过8h，有时冷藏可导致磷酸盐和尿酸盐析出形成沉淀，影响尿沉渣检查，尤其是微生物培养不能及时送检，必须冷藏。

2、化学防腐法：包括：①甲苯：当甲苯足够量时（一般用量为1.0-2.0ml甲苯/100ml尿液），可在尿液表面形成一薄层，防止细菌污染，通常用于尿酮体、尿糖，尿蛋白质等测定；②甲醛：每100ml尿液加40%甲醛0.5ml，可抑制细菌生长并固定尿中有形成分，适用于尿液中细胞与管型的测定；③麝香草粉：用量为0.1g麝香草酚/100ml尿液。用10%的麝香草酚异丙醇溶液可增加麝香草酚的溶解量，达到抑菌及保护代谢物的作用，适用于尿钾、钠、钙、氨基酸、糖、尿胆原、胆红素等测定；④浓盐酸：每100ml尿标本中假如浓盐酸1ml即可，使尿液维持在PH2.0左右。此标本主要可用于17-羟皮质类固醇、儿茶酚胺、VMA等定量测定等。具体使用前可与检验所联系。

第三节  粪便标本采集

一、粪便标本的采集

待查的粪便应收集在洁净、干燥不吸水的洁净蜡质盒或塑料盒内，避免外界杂物混入。不能用手纸包裹大便，通常各医院备有专用收集粪便标本容器。

二、粪便标本的种类及收集方法

    1、粪便常规检查标本：取新鲜粪便于专用有盖容器内。不可混入尿液及污水，以免破坏有形成分或使病原菌死亡及污染。一般挑取粘液、农学粪便送检。

2、粪便细菌培养标本：粪便普通细菌培养要求用无菌容器留取粪便。

第四节  前列腺液标本采集

由临床医师按摩前列腺采集，量少时直接滴与玻片上加盖玻片，量多则采集与洁净干燥试管内。微生物学检查应采集与无菌容器内。标本采集后立即送检。

                       第五节  脑脊液标本采集

正常脑脊液为无色、清亮水样液体，当脑组织和脑膜有病变，如感染、外伤或肿瘤时，可使脑脊液颜色、透明度、细胞及各种化学成分发生改变。

一、脑脊液检验的适应症与禁忌症

1、适应症：有脑脊膜刺激症状时可检查脑脊液以协助诊断；疑有颅内出血时；有剧烈头痛、昏迷、抽搐或瘫痪等症状和体征而原因不明者；疑有脑膜白血病患者；中枢神经系统疾病进行椎管内给药治疗、手术前腰麻、造影等。

2、禁忌症：凡疑有颅内压升高者必须做眼底检查，如有明显乳头水肿或有脑疝先兆者，禁忌穿刺。凡患者处于休克、衰竭或濒危状态以及局部皮肤有炎症、颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状者均禁忌穿刺。

二、脑脊液标本的收集

脑脊液一般由临床医师进行腰椎穿刺采集，必须时可从小脑延髓池或侧脑室穿刺获得。将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，每管收集1-2ml，第1管供细菌学检查（不可置冰箱保存），第二管供化学和免疫学检查，第3管供一般性状及显微镜检查。如疑有恶性肿瘤，可再留一管供脱落细胞检查。

三、注意事项

脑脊液标本采集后必须立即送检并及时检查。因为放置时间过久，其性质可能发生改变而影响检验结果，如细胞破坏，变性或细胞包裹于纤维蛋白凝块中，导致细胞数降低、分类不准确等；脑脊液葡萄糖因放置时间过长会分解，使之含量降低；细菌自溶或冷藏致细菌死亡影响细菌检出率等。

第六节  浆膜腔积液标本采集

浆膜腔积液包括胸水、腹水、心包液等，患者在用药前或停药1-2天后由临床医师行胸腔、腹腔或心包穿刺术获得标本。留取中段液体分别收集于4个无菌小瓶中，每管收集1-2ml，第1瓶供细菌学检查（可置于肉汤中增菌），第2瓶供化学和免疫学检查（其中化学检查宜用肝素抗凝），第3瓶供一般性状及显微镜检查（宜用EDTA-K2抗凝）。第4瓶不加任何抗凝剂，以观察有无凝集现象。标本采集后立即送检，以防细胞变性、出现凝块或细菌破坏溶解。

                    第七节  骨髓标本采集

由临床医生进行骨髓取材。成人一般取髂后、髂前上棘，其次为胸骨、棘突部位。穿刺部位的不同对检测结果有一定影响，再生障碍性贫血患者骨髓造血呈“向心性”分布，以胸骨穿刺为最佳，棘突次之，髂骨最差。若遇取材不佳或干抽可换部位取材。骨髓抽取后如做细菌培养，则先注入厌氧瓶，再注入需氧瓶，轻轻混匀。

骨髓涂片：用推片蘸取骨髓少许，置于载玻片右端三分之一处，放直径1-2ml大小骨髓一滴，使推片和骨髓液接触，当骨髓液扩散成均匀的粗线时与载破片以30-45度角向左均匀推进（骨髓液较浓时，角度要小，推速要慢；骨髓液较稀时，角度要打，推速要快），尾部应结束在载破片左侧六分之一处。骨髓推片5-10张，注意玻片要洁净，无油腻。

第八节 特殊临床微生物标本采集

一、普通细菌培养

  采集标本最好在发病早期及使用抗菌药物前或者体内血药浓度最低时。容器必须无菌，不能有溢漏或无盖，不含防腐剂或抑菌剂。1.脓液及创面分泌物标本的采集

1.1采取标本时，应尽量揩去病灶表面的污染菌，以免影响检验结果。用无菌棉拭采取脓液及病灶分泌物与无菌培养管内送检，亦可用无菌手术采取组织碎片送检。

1.2 脓样标本，最好用无菌注射器，抽取脓液，如行切开排脓亦可以用无菌棉拭采取标本送检。

2. 咽喉、鼻、耳、眼分泌物标本的采集

以无菌棉拭采取患者喉部或鼻、耳、眼部分分泌物，立即送检。采取标本时应尽量勿使棉拭接触唾液及口腔其他部位的黏膜，以防唾液的抑菌作用和杂菌污染。

3. 生殖器官标本的采集

以无菌棉拭采取病灶分泌物于培养管内，立即送检。做有关性病病原体PCR检测时，取特定容器，按要求留取标本。

4. 空气采样

4.1 采样高度：与地面垂直高度80-150cm；

4.2 布点方法：室内面积≤30m²，设一条对角线上取3点，即中心一点，两端个距墙1m处个取一点；室内面积＞30m²，设东、西、南、北点均距墙1m；

4.3 采样方法：用9cm直径普遍营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检培养。

4.4 消毒物体表面采样

4.4.1 采样时间：选择消毒处理后4h内进行采样。

4.4.2 采样面积：被采面积＜100cm²，取全部表面；被采面积≥100cm²，取100cm²。

4.4.3 采样方法：用5×5cm²的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管中送检，门把手等小型物体则采样棉拭子直接涂抹物体的方法采样送检。

4.5 医护人员手采样

4.5.1 采样时间：在接触患者、从事医疗活动前进行采样。

4.5.2 采样面积及方法：被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30cm²），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米（cm²）计算。

4.6 医疗用品采样

4.6.1 采样时间：在消毒或灭菌处理之后，存放在有效期内采样。

4.6.2 采样量及采样方法：可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》1990版一部附录中《无菌检查法》规定执行。对不能破坏性方法取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌生理盐水的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采样面＜100cm²，取全部表面；被采样面积≥100cm²，取100cm²送检。

4.7 使用中消毒剂与无菌器械保存液。

4.7.1 采样时间：采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。

4.7.2 采样量及方法：在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml被检样液，加入9ml稀释液中混匀，对于醇类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需在肉汤中加入0.1%硫代硫酸钠；对于洗必泰、季铵盐类消毒剂，需在肉汤中加入3%（W/V）吐温90和0.3%卵磷脂；对于醛类消毒剂，需在肉汤中加入0.3%甘氨酸；对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需在肉汤中加入3%（W/V）吐温80，以中和被检样液的残效作用采样送检。

第九节、 ¹⁴C幽门螺杆菌呼气试验标本采集

1.  目的

      采集标本以做¹⁴C幽门螺杆菌呼气试验

2.  适用范围

      适用于本所做¹⁴C幽门螺杆菌所需标本。

3.  标本采集

3.1 标本采集前注意事项

孕妇、哺乳期妇女不宜作此试验。如下因素可能影响该试验的诊断结果：一个月以内适用抗生素、秘制剂、质子泵抑制剂等Hp敏感药物；上消化道急性出血期可使Hp受抑制，有可能造成试验假阴性，应予注意。消化道出血一周以上，不影响诊断。部分胃切除手术可能造成同位素从胃中快速排空或患者胃酸缺乏。

3.2 标本容器

     专用集气瓶

3.3 标本的采集方法

     受试者应在空腹时或进食两小时以后受试，受试前漱口。受试者用约20ml凉饮用水送服尿素[14C]胶囊一粒后，静坐25分钟，开启CO2集气剂一瓶，插入一洁净的有防倒流装置的气体导管，导管下端应浸入集气剂液内，受试者通过导管吹气，力度适中以免液体测出，严禁倒吸，当CO2集气剂由紫红色变为无色时停止吹气（约1-3分钟），若超过3分钟褪色不全，亦停止吹气，此时CO2集气剂饱和，如因唾液等进入干扰非水滴定系统而影响变色，并不影响测试结果。

3.4 标本采集注意事项

CO2集气剂在使用前不得开启，以免因吸收空气中CO2而影响测量结果。每次取胶囊后应随即盖紧盖子，避免造成胶囊潮解粘连。胶囊如有破损，不得使用；集气剂如有渗漏，不得使用；集气剂变为无色，不得使用。CO2集气剂有一定毒性，严禁内服。气体样品收集完毕，在瓶盖上做好标记编号（不可在瓶壁标记）。

4. 标本运送和保存

       室温运送和保存

第十节  脱落细胞标本采集

1  目的

     有效地指导临床脱落细胞标本的采集，使标本中的待测成分不受影响，保证检测结果准确可靠。

2  适用范围

     适用于病理做临床脱落细胞项目所需标本的采集。

3  职责

3.1  临床脱落细胞标本由临床医护人员采集，客户单位医护人员必须明确通告患者临床脱落细胞标本采集的要求及注意事项；有义务向患者解释标本采集中的各种问题等。

3.2  临床脱落细胞检验标本的运送由临床检验所工作人员运送。

4  物品准备

     一次性垫巾、复合碘消毒液、2%利多卡因、血管钳、无菌洞巾、无菌棉签、穿刺针、口罩、载破片等。

5  检验申请单填写要求

5.1  检验申请单用钢笔填写，使用正楷字，自己清楚，填写完整。

5.2  填写内容包括：受检者姓名、性别、年龄、住院号/门诊号、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集年月日时、申请医生及采样者签名。

6  患者准备

     患者按医、护人员指导的要求进行准备。

7  操作步骤：

7.1  直视采集法：

        外阴、阴道、阴道穹隆、宫颈、口腔、肛管、鼻腔、鼻咽部、眼结膜及皮肤等部位，可以直接用刮片刮取、吸管吸取、刷洗、食管、胃、直肠、气管和肺内支气管则使用纤维内镜在病灶处直接刷取细胞制片。

7.2  自然分泌液的采集法：

7.2.1  痰液涂片检查：痰为支气管等无锡的分泌物，对支气管肺癌和其它呼吸道疾病细胞学诊断具有重要价值。

7.2.2  尿液涂片检查：收集尿液中脱落的泌尿道细胞成分，作泌尿道肿瘤和某些疾病的细胞学诊断。

7.2.3  乳头溢涂片检查：用于导管内乳头状瘤和乳腺癌细胞学检查。

7.2.4  前列腺液涂片检查：采用前列腺按摩法取得分泌物，作前列腺细胞学诊断。

7.3  灌洗法：

     向空腔气管或腹腔、盆腔（刨腹探查时）灌注一定量生理盐水冲洗，使其细胞成分脱落于液体中，收集灌洗液离心制片，作细胞学检查。

7.4  磨擦法：

     利用磨擦工具在病变部位磨擦，将擦取物直接涂片。常用磨擦工具有海棉磨擦器、线网套、气囊等。可分别用于鼻喉部、食管和胃部病灶的取材。

7.5  针穿抽吸法：

     当有胸腔、腹腔、心包腔及关节腔积液时，可用针穿抽吸部分积液作细胞学检查。此外某些深部组织器官，如淋巴结、甲状腺、软组织、肝等亦可作细针穿刺吸取部分细胞进行图片诊断。

7.6  涂片制作方法：

7.6.1 涂片前准备工作及涂片方法

7.6.1.1涂片前准备工作

a)保证标本新鲜，取材后尽快制片。

b)涂操作要轻巧，避免挤压以防止损伤细胞。涂片要均匀，厚薄要适度，太厚细胞堆叠，太薄细胞过少，均影响诊断。

   c)玻片要清洁无油渍，先用硫酸洗涤液浸泡冲洗，再用75%乙酸浸泡。

   d)含蛋白质的标本可直接涂片，缺乏蛋白质的标本，涂片前先在玻片上涂薄层粘附剂，以防止染色时细胞脱落，常用粘附剂为蛋白甘油，由等量生鸡蛋白和甘油混合而成。

   e）每位患者的标本至少涂两张玻片，以避免漏诊。涂片后立即在玻片一端标上编号。

7.6.1.2 涂片制备方法

   a）推片法：用于稀薄的标本，如血液，胸、腹水等。取离心后标本一小滴滴在玻片偏右侧端，用推片用30度夹角将玻片上检液轻轻向左推。

   b）涂抹法：适用于稍稠的检液，如鼻咽部标本。用竹棉签在玻片上涂布，由玻片中心经顺时针方向外转圈淫抹；或从玻片一端开始平行涂抹，涂抹要均匀，不宜重复。

   c) 压拉涂片法：将标本夹于横竖交叉的两张玻片之间，然后移动两张玻片，使之重叠，再边压边拉，获得两张涂片。该法适用于较粘稠标本，如痰液。

   d）吸管推片法：用吸和将标本滴在玻片一端，然后将滴管前端平行置于标本滴上，平行向另一端均速移动滴管即可推出均匀薄膜。此法亦适用于胸、腹水标本。

   e) 喷射法：用配细针头的注射器将标本从左至右反复均匀地喷射在玻片上，此法适用于各种吸取的液体标本。

   f) 印片法：将切取的病变组织用手术切开，立即将切面平放在玻片上，轻轻按印。此方法为活体组织检查的辅助方法。

7.6.2 涂片的固定

7.6.2.1固定液：细胞学检查常用的固定液有下列三种：第一种乙醚酒清固定液：该固定液渗透明性较强，固定效果好适用于于一般细胞学常规染色；二种是氯仿究竟固定液：又称卡诺氏固定液。其优点同上；第三种95%酒精固定液：适用于大规模防癌普查。制备简单。但渗透作用稍差。

7.6.2.2 固定方法

   a) 带湿固定： 涂片后未待标本干燥即行固定的方法称带湿固定。此法固定细胞结构清楚，染色新鲜。适用于巴氏或HE染色。痰液、阴道分泌物及食管拉网涂片等常任常用此方法。

   b）干燥固定：涂片后未待其自然干燥，再行固定。适用于稀薄标本如尿液、胃冲洗液等，也适用于于瑞特染色和姬姆萨染色。 

7.6..2.3 固定时间：一般为15-30min。含粘液较多标本，如痰液、阴道分泌物、食管拉网等因定时在适当延长；尿液、胸、腹水等涂片不含粘液， 固定时间可酌情缩短。

8  注意事项

8.1 正确地采集标本时细胞学诊断的基础和关键之一，故要准确地选择部位，尽可能在病变区直接采集细胞。采集的标本必须保持新鲜，尽快制得，以免细胞自溶或腐败。尽可能避免血液、粘液等混入标本内，采集方法应简便，操作轻柔，避免患者痛苦和引起严重并发症及促进肿瘤扩散，下面介绍几种常用的标本采集方法。

8.2 固定的目的是保持细胞自然形态，防止细胞自溶和细菌所致的腐败；固定液能沉淀和凝固细胞内蛋白质和破下细胞內溶酶体酶，使细胞不但保持自然形态，而且结构清晰，易于着色。因此标本愈新鲜，固定愈及时，细胞结构愈清晰，染色效果愈好。

9 标本送检

    标本应立即送检

10 标本拒收

10.1 检验申请单填写内容碧玺齐全，不全者拒收。

10.2 标本身份不明：例如：采标本没有标记或标记错误与检验单申请不符。

第十一章  病理组织标本采集

1 目的

有效地指导病理组织标本的采集，使标本中的待测成分不受影响，保证检测结果准确可靠。

2 适用范围

适用于做病理项目所需病理组织标本的采集

3 职责

3.1 病理组织标本由临床医护人员采集，客户单位医护人员必须明确通告患者病理组织标本采集的要求及注意事项；有义务向患者解释标本采集中的各种问题等。

3.2 病理组织检验标本的运送应由临床检验所工作人员运送。

4 物品准备：

10%甲醛溶液、无水乙醇、封口病理标本专用塑料袋等。

5 检验申请单填写要求：

5.1 检验申请单用钢笔填写，使用正楷字，字迹清楚，填写完整。

5.2 填写内容包括：受检者姓名、性别、年龄、住院号/门诊号、化验单编号、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集标本年月日时、申请医生及采样者签名。

6 患者准备：

患者按医、护人员指导的要求进行准备。

7 操作步骤

7.1 前期准备

7.1.1 临床医师逐项准确填写病理检查申请单，传递患者的主要临床信息。

7.1.2 容器须洁净，容器瓶口宜大。

7.1.3 若同一患者不同标本或同一标本的不同部位送检，请分别置不同容器。

7.2 标本采集

7.2.1 取标本时忌用有齿钳（镊）夹取或挤压，以免产生人为细胞变形。

7.2.2 采集标本时需保持其完整，切勿任意切割、翻转。

7.3 标本固定

7.3.1 宜采用10%甲醛溶液，有特殊要求者除外，例如检查组织内糖类及尿酸结晶需用纯乙醇固定，固定液的量至少为待检标本体积的4-5倍以上。

7.3.2 离体标本须立即全部固定，固定时容器须密闭，避免固定液挥发或溢出。

7.3.3 固定长条形标本时尽量避免弯曲扭转。

7.4 标本核对

7.4.1 病理申请单与标本核对无误后分别装入相应容器送检。

7.4.2 送检标本应包括全部手术切除部分。

7.4.3 接收标本必须进行严格的查对签收制度，标本带（瓶）上姓名、条形码应与申请单上姓名、条形码相同，以免发生差错。

8 预防感染：

    病理组织标本的采取和手机应严格遵守操作规程，为预防由于患者病理组织引起的人类免疫缺陷病毒和肝炎病毒等感染，实验室及临床工作人员在进行标本采集、收集和处理工作时应戴乳胶、聚乙烯或其他塑料的一次性手套。

9标本送检

    标本应立即送检。

10 标本拒收：

10.1 申请单与相关标本同时送达病理科。

10.2 申请单中填写的内容与送检标本不符合。

10.3标本上无有关患者姓名、科室等标志。

10.4 申请单内容填写的自己潦草不清。

10.5 申请单中漏填重要项目。

10.6 标本严重自溶、腐败、干涸等。

10.7 标本过小，不能或难以制作切片。

10.8 其他可能影响病理检查可行性和诊断准确性的情况。